茶叶、槐米、金荞麦、红花醇提物的抗氧化活性的比较研究

茶叶、槐米、金荞麦、红花醇提物的抗氧化活性的比较研究

完成机构：中国中医科学院中药研究所,北京100700

保健食品功效有那些找些有根据的说明下.

中国保健食品网公布权威保健食品功效 http://www.zgbjspw.com 1. 类异戊二烯衍生物 三萜酸、维生素E、皂苷、胡萝卜素类、简单萜类 2. 酚类成分 类黄酮、多酚类化合物、苯丙基类化合物 3. 以蛋白质或氨基酸为基础的衍生物 烯丙基-硫-化合物、异硫氰酯类化合物、酰胺类和辣椒素类成分 4. 碳水化合物及其衍生物 维生素C、低聚糖、非淀粉性多糖 5. 多不饱和脂肪酸 多不饱和脂肪酸 1.类异戊二烯衍生物 三萜酸 三萜酸中的熊果酸（Ursolic acid）及齐墩果酸（Oleanolic acid）在植物界中较广泛地存在。前者在栀子、芦笋、车钱草、女贞子、泽兰等中草药中存在；后者在女贞子、甜菜、楤木、木瓜等中草药中。它们具有抗突变、预防癌症、护肝降酶、抗炎等多方面的活性。它们又可与糖结合形成多种三萜皂苷。 甘草中所含的甘草次酸（Glycyrrhetinic acid）具有肾上腺皮质激素样作用，有抗炎、抗肿瘤等多种活性。其苷即甘草甜素（Glycyrrhizin）是甘草甜味的物质基础，也具有甘草次酸相似的作用。灵芝中含有一系列三萜酸，是灵芝的主要生理活性成分，如灵芝酸A、B、C、D等（Ganoderic acid）具有明显的保护肝脏作用，灵芝酸F有很强的抑制血管紧张素酶的活性。另外茯苓中所含的茯苓酸和泽泻中的三萜类成分也具有生物活性。 淡竹叶中三萜类成分主要有芦竹素（Arundoin）和白茅素（Cylindrin）。淡竹叶的主要药理作用有解热、抑菌、利尿作用。动物实验表明有升高血糖的作用。白茅根中也含有芦竹素和白茅素，具有止血和利尿的作用。 维生素E 维生素E是生育酚和三烯生育酚及其衍生物的总称，广泛地存在于植物油、全谷类、小麦胚芽、糙米、坚果和其他食物中，沙棘的果肉中也含有丰富的维生素E。它是公认的强力抗氧化剂，被称为抗御血脂肪过氧化的第一道防线，有抗衰老、预防癌症、防治心脏病、提高机体免疫力、健脑以及有益于糖尿病患者等多方面的作用，因而受到广泛的重视。 具有维生素E生理活性的生育酚和三烯生育酚类共有八种化合物，主要区别在于苯环上甲基取代的数量和位置的不同。其中生物活性最高、天然界分别最广的为α-生育酚。 皂苷 皂苷为糖苷化合物，主要有三萜皂苷和甾体皂苷。其非糖部分被称为皂苷元。三萜皂苷是植物界分布最广含量最多的皂苷。其苷元主要是五环三萜和四环三萜类。由于取代和构型的不同，三萜苷元的数量很大。它们常常作为滋补强壮的作用活性存在于保健中草药中，最为著名的是人参、西洋参和三七中所含的各种人参皂苷（Ginsenosides）、绞股蓝皂苷等。甾体皂苷的数量和分别明显少于三萜皂苷，在薯蓣、黄精、玉竹、薤白、知母、麦门冬和蒺藜等中药中存在，通常具有壮阳、防癌、调节血脂和调节血糖等方面的功能。已知的甾体苷元已超过100种，其中多数为螺旋甾烷或呋甾烷，其余为胆甾烷。另外还有一类以甾体生物碱为苷元的皂苷，其分布有限，绝大部分分布于茄科，包括常用蔬菜马铃薯、西红柿、茄子等。 许多含皂苷的植物作为食物有很长的历史，如大豆、豌豆、燕麦、大蒜、马铃薯、洋葱、薯蓣等。皂苷具有多种药理作用，如人参皂苷具有中枢神经调节作用、调节血压作用、降血脂作用、抗肿瘤作用等。柴胡皂苷D具有抗病毒、抗炎、抗肝损害作用。由于植物中的皂苷成分非常复杂，单一成分较难分离，很多皂苷的明确构效关系还很难确定。根据皂苷的功效和作用，可将常用的皂苷的中草药归类如下： 滋补强壮功能：人参、刺五加、绞股蓝、珠子参、山药、黄精、黄芩、麦冬、玉竹、山茱萸、牛膝。 镇静安眠：大枣、酸枣仁、百合，远志、合欢皮。 调节血糖：刺五加、木鳖子、楤木、远志。 抗溃疡：甘草、绞股蓝、金盏花、三七。 抗炎：甘草、积雪草、金盏花。 免疫调节：人参、刺五加、黄芪、楤木、金盏花。 调节血脂：人参、楤木、金盏花、葫芦巴、薤白。 保肝：柴胡。 胡萝卜素类 胡萝卜素类作为色素存在于食用植物中，例如胡萝卜、番茄以及沙棘果实中均有大量存在。其中沙棘果实所含的胡萝卜素成分可达3%以上。最常见的β-胡萝卜素在体内和体外实验中，以及在人群干预试验中，均被证实具有预防肿瘤的作用。枸杞子中含有丰富胡萝卜类成分，特别是鲜枸杞果中胡萝卜素的含量可高达19.6mg/100g，同时还含有其他胡萝卜素类物质如酸浆果红素（Physalien）、玉蜀黍黄素（Zanxanthin）、隐黄素（Crytoxanthin）等。这些色素类成分与枸杞的明目功效有直接的联系。覆盆子中也含有丰富的胡萝卜素类成分。 简单萜类 药食两用的紫苏叶、高良姜、姜、益智仁、丁香、薄荷、小茴香、八角茴香、砂仁、肉桂以及一些调香料中均有存在。其中有些成分具有生理活性。例如小茴香挥发油中所含的反式茴香脑可以升高白细胞。薄荷中的薄荷醇（薄荷脑，Menthol）具有抗炎、清凉、止痛、祛痰等多种作用，在保健食品中广泛应用。紫苏叶中的紫苏醛（Perillaaldhyde）具有镇静、抗真菌等方面的作用。八角中的茴香醛也具有抑制真菌的作用。富含挥发油的品种还有玫瑰花、代代花、金银花、霍香、香薷等。 萜类挥发油具有抑制肿瘤的作用，体现在延长肿瘤潜伏期、减少癌变发生等方面。具有代表性的萜类化合物主要有柠檬烯（Limonene），在柠檬、柑桔、豆蔻、花椒、芹菜子、茴香、佛手、杜鹃、莳萝、薄荷、代代花等植物中存在；桉树脑（Eucalyptol），在橄榄、迷迭香、麝香草、罗勒、熏衣草等植物以及桉树油中存在；左旋葛缕酮（Carvone），在薄荷、莳萝、茵陈篙、白豆蔻等植物中存在。香薷全草含挥发油2%，其中香荆芥酚（Carvacrol）的含量达到70%。香薷含挥发油含量可达2%，其中主要有广霍香醇、广霍香酮和广霍香烯。广霍香挥发油具有调节肠胃功能的作用，刺激肠胃运动、促进肠胃分泌解除痉挛等。对病源微生物广霍香挥发油也具有很好的抑制作用。菊花传统上具有清热、平肝明目、解毒的功效。菊花的挥发油含量约为1.5%，主要成分有龙脑、樟脑、菊油环酮（Chrysanthemon）等。野菊花所含挥发油的含量在0.55%~2%，主要成分有侧柏酮、龙脑、樟脑等。野菊花具有抗病源微生物、降低血压、降血脂等方面的作用。丁香花的挥发油含量很高，一般在16%以上，其中丁香酚（Eugenol）的含量在70%~85%之间，其他主要成分还有乙酰丁香酯（Acetyleugenol）和葎草烯（Humulene）等。丁香具有健胃、抗溃疡、镇痛、抗炎、抗缺氧、抗菌等作用。母菊又称洋甘菊（Matricaria recutita L．）为欧洲常用草药，多用于保健食品和化妆品中。此品种现在国内上海、江苏等地有栽培，已成为生长良好的归化植物。其药用部位头状花序含挥发油可高达1.9%。挥发油呈蓝色，其中主要成分为蓝香油奥（Chamazulene）和α-甜没药萜醇（α-bisabolol）。蓝香油奥并不是植物本身所含的成分，它是在水蒸气蒸馏过程中无色母菊素（Matricin）转化过来的。母菊挥发油具有明显的抗炎解痉、抗菌、抗真菌、抗病毒和抗溃疡作用。由于母菊挥发油具有消炎、抗组织胺、抗透明质酸的作用，能降低毛细血管的通透性，被广泛用于化妆品特别是婴幼儿护肤用品中。 二、酚类成分 类黄酮 类黄酮是指具有C6-C3-C6基本构造的酚类化合物，根据其中央的吡喃环的不同取代和氧化水平，又分为黄酮（Flavone）、黄酮醇（Flavonols）、异黄酮、黄烷酮、原花色素、查儿酮。类黄酮常与糖相接形成糖苷。又报道记载的天然黄酮超过6000种，其存在形式包括游离形式、糖苷和其他衍生物。 1、黄酮 常见的如木樨草素（Luteolin）和芹菜素（Apigenin）在高等植物中分布十分普遍。前者在金银花等植物中存在，具有抗菌、抗炎、调节血脂、祛痰等多种活性。后者在芹菜中存在，有利尿、调节血压、抗菌、消炎等方面的作用。 2、黄酮醇（Flavonols） 也是在高等植物中广泛分布的成分，特别是木本植物中。常见的有槲皮素（Quercetin），山柰酚（Kaemferol）及杨梅素（Myricetin）等。槲皮素具有很好的抗氧化作用及其他生理活性。它们与糖结合形成多种黄酮苷，存在于菠菜、侧柏叶、鱼腥草等植物中，有调节血糖、抗病毒、抗炎等多方面的作用。银杏中的黄酮主要以山柰酚、槲皮素和异鼠李素（Isorhamnetin）作为苷元，具有改善血液循环、调节血脂等方面的作用。此外沙棘、蒲黄等含有的黄酮也均具有改善血液循环等方面的作用。槐米、槐花中含量较高的芦丁，即槲皮素3位葡萄糖苷，小蓟中也含有芦丁，它们均具有止血、抗炎、强心等作用。 3、黄烷酮 橘类黄酮属于黄烷酮在橘皮、青皮、枳壳、枳实、香橼、柠檬等植物中广泛存在。此类黄酮具有解痉挛、升血压、抗溃疡、祛痰抗炎等方面作用。 4、异黄酮 异黄酮由于其具有很好的保健功能，已成为目前国际上广泛注意的热点之一。已知的异黄酮超过1000种，其中金雀异黄素（Genistein）、芒柄花素（formononetin）、大豆苷元（Daidzein）、鸡豆黄素（Biochanin）为4种具有明确的雌激素样作用的异黄酮苷元，动物试验证明异黄酮与雌二醇一样，能阻止切除卵巢后骨矿物质密度降低。此外还具有抗氧化作用，可抑制LDL胆固醇的氧化；促进钙离子在细胞内潴留，抑制破骨细胞的活性，金雀异黄素在体外和体内均具有显著的抗肿瘤活性。异黄酮主要分布在豆科植物中，如黄豆中含有很高的大豆苷元、金雀异黄酮为苷元的异黄酮苷，这些糖苷在小肠上端被吸收，由肠道微生物水解成苷元起作用。豆科植物红三叶草（Trifolium pratense）是一种优质的牧草，它含有较高含量的上述四种异黄酮，是一种很好的异黄酮来源，也是国际上异黄酮研究和开发的重点。 葛根是一种常用的药食两用品种，也是一种豆科植物，其中所含的异黄酮含量可高达15%，其中主要成分为葛根素（Puerarin）和大豆苷（Daidzin）以及大豆苷元，其中葛根素是以大豆苷元为苷元的8位接葡萄糖的碳苷，大豆苷为大豆苷元的7位葡萄糖苷。 此外葛根还含有金雀异黄素、芒柄花素以及葛根苷A，B等多种异黄酮苷。葛根总黄酮具有调节心脏功能和代谢，扩张冠状血管和脑血管，降低血压、降低血糖、调节血脂、解毒、解酒等作用，是一种很好的开发保健食品的品种。豆科植物补骨脂除了含有香豆精类、查耳酮类等有效成分，也含有异黄酮成分如新补骨脂异黄酮（Neobavaisoflavone）、补骨脂异黄酮（Corylin）等。补骨脂具有雌激素样作用、抗衰老、强心等方面的作用。中药射干是鸢尾苷、鸢尾苷元、野鸢尾苷、野鸢尾苷元、鸢尾异黄酮等多种成分、射干除了具有抗炎解热等作用外，在体外试验中也表现出结合雌激素受体的作用。 苯丙基类化合物 苯丙基类化合物包括香豆素、木脂素等。 1、香豆素（Coumarins） 香豆素分为简单香豆素包括双分子和三分子香豆素的聚合物，呋喃香豆素、吡喃香豆素。 简单香豆素一般具有抗炎、消肿、解痉挛、镇静、抗菌等作用。伞花内酯（Umbelliferone）存在于芸香、柚皮、花椒等植物中，具有抗菌、降压、抗肿瘤作用。花椒中还含有脱肠草素（Herniarin）。 花椒中所含的香柑内酯（Bergapten）和补骨脂所含的补骨脂内酯（Psoralen）是典型的呋喃香豆素，它们均对皮肤有光敏活性和抗菌作用。花椒中还含有吡喃香豆素花椒内酯。 2、木脂素 木脂素是由2分子或3分子苯丙基以不同形式聚合而成的一类化合物。白藜芦醇（Resveratrol）存在于葡萄皮及籽中，酿制的葡萄酒中含有白藜芦醇，有抗氧化和预防肿瘤的作用。土大黄苷（Rhaponticin）有调节血糖的作用。厚朴中的厚朴酚（Magnolol）具有很强的抗菌作用。 五味子中所含的木脂素高达10%以上，其中主要有五味子素（Schisandrin）、去氧五味子素（Deoxyschisandrin）、五味子乙素（Wuweizisu-B）等20余种。五味子木脂素具有明确的降酶保肝、抗氧化、中枢镇静、调节血压等多种作用。黑芝麻中含芝麻素（Sesamine）和芝麻林素（Sesamolin）等木脂素，黑芝麻具有降血糖、抗衰老、降血脂等方面功能。 3、酚酸成分 此类成分包括咖啡酸（Caffeic acid）、阿魏酸（Ferulic acid）、迷迭香酸（Rosmarinic acid）、丹酚酸（Salvinolic acids）、紫草酸（Lithospermic acid）等。存在于杜仲、莱菔子、泽兰、单参、紫草、莳罗等植物中。它们多具有抗炎、抗病毒、抗菌、止痛等作用。丹参中水溶性成分丹酚酸等具有促进血液循环的作用 多酚类化合物 儿茶素及表儿茶素在植物界广泛存在，常形成各种聚合物。目前国际上流行的绿茶、葡萄籽等保健食品，均是取自茶多酚或其多聚物。 儿茶素属于黄烷醇类，在自然界多以其衍生物或者聚合物形式存在。 儿茶素在茶叶、银杏、罗布麻、槟榔存在，表儿茶素在茶叶、银杏、越橘、贯叶连翘等中存在。它们具有止泻、保肝、降低胆固醇、抗炎等方面的作用。茶多酚是茶叶中儿茶类成分和其他多酚类成分，如花青素、黄酮类成分、酚酸等成分的总称，占茶叶的10%~20%。在未经过发酵的绿茶中儿茶素类成分含量最高，可达25%，主要以儿茶素、表儿茶素、没食子酚儿茶素（Gallocatechin）、表没食子酚儿茶素（Epigallocatechin），经过发酵的茶叶如红茶、乌龙茶等主要含有上述多酚的缩合物、茶黄素（Theaflavins）、花青素的多聚物合高度缩合的鞣质等。茶叶除了具有由于咖啡因、茶碱、可可碱所引起的提神、利尿作用以外，其茶多酚具有的多种药理作用受到越来越多的关注。茶多酚具有很强的抗氧化合清除自由基的作用，具有明显的抗衰老作用，特别食儿茶素的作用更为明显，其作用强于广泛应用的生育酚合抗血酸，并与之有协同作用。茶多酚在体外合体内试验中均被证明具有抗突变的阻断亚硝胺形成的作用，亚硝胺是一种很强的致癌物，国内外流行病学研究结果表明，茶叶的摄入量与多种肿瘤的发生呈现负相关。茶叶的抗肿瘤作用机制主要为以下几个方面：茶多酚的抗氧化和清除自由基的作用；阻断致癌物的形成；对肿瘤细胞的毒化作用；免疫促进作用；抑制致癌过程的启动和促进作用等方面。此外，茶多酚还具有很好的降低血脂的作用。 余甘子为药食两用品种，在民间广泛食用，鲜果含嚼治咽喉炎。余甘子中主要成分为多酚类成分，没食子酸、鞣花酸（Ellagic acid）、鞣云实素（Corilagin）、原诃子酸（Terchebin）、诃子次酸（Chebulic acid）等多种多酚类成分。余甘子具有降低血脂、抗诱变、抗肿瘤、抗氧化等方面作用，临床上对高血压、乙型肝炎、慢性咽炎、延缓衰老有良好的治疗效果。 使君子科植物诃子也含有较高类似于余甘子的多酚类成分，包括没食子酸、鞣花酸、鞣云实素、原诃子酸、诃子次酸等。诃子具有抗炎、抗菌、抗氧化和抑制肿瘤的作用。 金樱子为蔷薇科植物，含有较高多酚类化合物，如金樱子素A，B，C，D（Laevigatins A，B，C，D）、原花青素等多种成分。金樱子具有抗菌、降血脂、改善肠胃道功能等方面作用。葡萄籽和葡萄皮中也含有大量的多酚类成分，是一种很好的抗氧化剂。 山楂中表儿茶素和多酚类缩合黄烷聚合物含量很高，是其降血脂、降血压、抗氧化、增强免疫、和保护心肌损伤的有效成分。金荞麦中的多酚类成分具有明显的抗肿瘤活性。 三、以蛋白质或氨基酸为基础的衍生物 烯丙基-硫-化合物 此类成分在葱属植物中广泛存在，如大蒜、洋葱、小葱、冬葱。主要成分有蒜氨酸（Alliin），大蒜被压碎时，在蒜氨酸裂解酶的催化作用下转变为大蒜素（Allicin）。这是大蒜和葱的发出特殊气味的原因。 洋葱中的主要成分为环蒜氨酸和蒜氨酸的丙基和丙烯基取代物。大蒜中的有效成分为大蒜素。加热和用溶剂的大蒜制剂失去酶活性，不能转变为大蒜素，而大蒜干粉保存了蒜氨酸分解酶的活性。大蒜具有抗氧化活性，在人体试验中具有降低血脂，促进免疫系统，增强自然杀伤细胞的活性，抑制血小板聚集以及降低消化道肿瘤发生的危险等作用。薤白挥发油中含有蒜氨酸、甲基蒜氨酸等多种含硫化合物，具有很好的降血脂，抑制脂质过氧化作用。 异硫氰酯类化合物 此类成分在十字花科蔬菜中较为普遍存在，在花椰菜、球芽甘蓝、花菜、圆白菜和甘蓝中，含量较高。由于发现其对肿瘤有很好的预防作用，受到国际上广泛重视。异硫氰酯类化合物在植物中以葡萄糖异硫氰酸盐的形式存在，已经报道的葡萄糖异硫氰酸盐超过百种。葡萄糖异硫氰酸盐经水解产生一系列水解产物具有生物活性的异硫氰酸盐。在动物实验中，异硫氰酸盐选择性地抑制动物组织肿瘤的发生，其作用机制与异硫氰酸盐有效抑制细胞色素P450酶代谢致癌物，增强II相代谢酶的活性、抑制肿瘤细胞分化和诱发肿瘤细胞凋亡有直接相关。 酰胺类和辣椒素类成分 胡椒中含有酰胺类成分胡椒碱、胡椒酰胺、次胡椒酰胺、胡椒油碱，这些成分是胡椒的有效成分，具有镇静止痛、健胃等作用。 辣椒素类成分是辣椒中所含的具有辣味的一类酸性酰胺类物质，其中具有代表性的成分为辣椒素（Capsaicin）及其衍生物，其含量在0.5%~0.9%之间。此外辣椒还含有较高的胡萝卜素类成分（0.35%）、维生素C（0.2%）、黄酮（成皮苷、芦丁）等。辣椒素类成分具有抗炎、镇痛、降血脂、促进免疫、促进胃液分泌、振奋情绪等作用。 四、碳水化合物及其衍生物 维生素C 在蔬菜、水果中广泛存在，例如猕猴桃、沙棘果、酸枣、刺梨果、野玫瑰果等。大量研究证明维生素C具有较强的抗氧化作用。药食两用品种余甘子和中药诃子、金樱子中也含有较高含量的维生素C，可用于提取天然维生素C。如金樱子的含量可达1.5%，可用于生产多种保健食品和高维生素C袋泡饮料等产品。 低聚糖 指功能性低聚糖，包括低聚果糖、低聚异麦芽糖、低聚木糖等。低聚糖的功能主要体现在以下几个方面：促进双歧杆菌的增值，抑制肠道有害菌；改善便秘；降低血脂等。 非淀粉性多糖 在提高免疫方面起着重要作用。保健中药如枸杞、地黄、当归、淫羊藿、灵芝、人参、黄芪、女贞子、牛膝、薏苡仁、山药、刺五加、苍术、桑白皮及一些菌类如木耳、香菇、紫菜、昆布、银耳等具有免疫促进作用，用于肿瘤的预防和辅助治疗。很多多糖还具有降血糖、抗炎、抗衰老等多方面作用。植物多糖的生物活性与其化学结构、分子量、溶解度等多方面因素有关。由于多糖的结构非常复杂，许多结构上的立体构型和构像还需要进一步阐明，所以多糖构效关系还没有完全搞清楚。 五、多不饱和脂肪酸 多不饱和脂肪酸 ω-3多不饱和脂肪酸包括二十碳五烯酸（Eicosapentaenoic acid，EPA）、二十二碳五烯酸（Docosapentaenoic acid，DPA）、二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid，DHA）、亚麻酸（α-Linolenic acid）、ω-6多不饱和脂肪酸包括亚油酸（Linoleic acid）、γ-亚麻酸（γ-Linolenic acid）。 不饱和脂肪酸对调节血脂、肿瘤预防、改善记忆等方面起重要作用。目前流行的月见草油、薏苡仁油以及沙棘油中均含有较高的不饱和脂肪酸。紫苏子、芹菜籽、桃仁中含有较高的γ-亚麻酸，他同时还具有较强的抗炎活性，对于风湿性关节炎和皮肤炎症具有很好改善症状的作用。 ω-3多不饱和脂肪酸在海鱼的油中含量很高，很多流行病学资料表明，摄入适量的鱼油可以减少心脑血管病的发病率和死亡率。

[猴头菌提取物抗氧化活性研究] 紫苏叶提取物抗氧化活性

　　分别采用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）分析法和改良邻苯三酚自氧化法，对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力，清除?OH、DPPH?和O?-?2?自由基的能力进行测定。结果表明：醇提物还原力较强，且还原力大小与浓度成正比；猴头菌水提物和醇提物均有清除?OH、DPPH?和O?-?2?自由基的能力，且水提物的效果比醇提物好；水提物和醇提物对?OH、DPPH?和O?-?2?的清除能力依次为DPPH?、?OH和O?-?2?，并且在一定浓度范围内，清除率与浓度成正比。
　　猴头菌； 清除自由基； 抗氧化活性
　　人体持续暴露在活性氧与促氧化剂中时，很容易引起机体组织产生氧化应激，导致代谢性功能紊乱以及一系列的慢性疾病［1］。食用一些富含具有抗氧化活性物质的功能性食品可以减轻机体组织氧化应激或预防损伤。一些合成抗氧化剂与天然抗氧化剂相比，尽管具有很强的清除自由基活性，但同时也具有强的毒副作用，因此人们倾向于从自然界中寻求更安全的抗氧化剂。LEE等［2］从桦褐孔菌（Inonotus obliquus）中分离到一些具有较强活性的抗氧化成分（多酚类化合物）。MAU等［3］研究表明灵芝(Ganoderma lucidum)是很好的天然抗氧化剂。同为食用菌的猴头菌(Hericium erinaceus)是著名的药膳两用真菌，具有抗溃疡、抗炎症、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、保肝护肝和降血脂、降血压等作用［4］。笔者通过对猴头菌子实体的水提物和醇提物总还原力、清除?OH、2,2-二苯基-1-苦肼基自由基（DPPH?）及O?-?2?自由基的研究，旨在为其在医药保健方面的利用提供理论依据。
　　1 材料与方法
　　1.1材料
　　猴头菌（H. erinaceus)子实体由上海市农业科学院食用菌研究所提供。
　　1.2主要试剂与仪器
　　柠檬酸、Na 2HPO 4、NaH 2PO 4、六氰合铁酸钾（铁氰化钾）、醋酸、三氯化铁、维生素C、FeSO 4?7H 2O、30％H 2O 2溶液、水杨酸、无水乙醇、95％乙醇等（国药集团化学试剂有限公司），DPPH（美国Sigma公司），实验用水（娃哈哈纯净水）；infinite M200 PRO酶标仪（瑞士TECAN公司）；UVmini-1240分光光度计（日本SHIMADZU 公司)。
　　1.3提取物的制备
　　1.3.1水提物
　　干燥猴头菌子实体，用粉碎机粉碎，称取 50 g粉末，加1 L蒸馏水超声20 min，过滤，滤液减压浓缩，反复3次，合并浓缩液，转至蒸发皿中， 60 ℃水浴蒸干，备用。
　　1.3.2醇提物
　　同样称取50 g猴头菌子实体粉末，加1 L 95％乙醇超声20 min，过滤，其它操作步骤同 1.3.1。
　　1.4母液制备
　　将猴头菌醇提物和水提物配制成 20 mg/mL，作为供试母液。
　　维生素C作为阳性对照，称取一定量的维生素C定容到浓度为1 mg/mL，作为对照母液，避光 4 ℃保存。
　　1.5DPPH溶液的配置
　　精密称取19.7 mg DPPH，用无水乙醇溶解并定容于250 mL容量瓶中，DPPH浓度为2×10-4 mol/L，避光4 ℃保存。
　　1.6总还原力测定
　　按照参考文献［5］操作进行总还原力测定。
　　1.7?OH自由基清除活性测定
　　以SMIRONFF等［6］的Fenton法为基础加以改进，向试管中分别加入2、4、6、8、10、12、14、 18 mg/mL不同浓度样品2 mL，然后依次加 6 mmol/L的FeSO 4溶液2 mL， 2.4 mmol/L的 H 2O 2溶液2 mL，摇匀，静置 10 min，再加入 6 mmol/L的水杨酸溶液2 mL摇匀， 37 ℃水浴 30 min， 1016 g离心10 min，取上清液于510 nm处测吸光度（A）值，以维生素C作为阳性对照。
　　清除率S＝［1-(A i-A j)/A 0］×100%
　　A 0：以纯水替代样品的空白对照；A i：反应液的A值；A j：以纯水替代水杨酸时提取液自身的A值
　　1.8DPPH自由基清除活性测定
　　采用DPPH分析法，根据参考文献［7、8］研究方法加以改良，测定了提取物抗氧化活性。将 1 mL样品加入1 mL 的2×10-4mol/L DPPH无水乙醇溶液，摇匀，避光放置30 min，于517 nm处测定其A值，以维生素C作为阳性对照。
　　清除率S＝［1-(A i-A j)/A 0］×100%
　　A 0：以纯水替代抗氧化剂的DPPH溶液的A值；A i ：加了抗氧化剂后DPPH 溶液的A值；A j：以无水乙醇替代DPPH溶液的抗氧化剂溶液的A值
　　1.9O?-?2?自由基清除能力测定
　　采用改良的邻苯三酚自氧化法［9］。首先根据下列公式计算邻苯三酚自氧化率。
　　邻苯三酚自氧化率 ＝ (A 4min－A 1min)/3
　　A 4min为第4分钟的A值，A 1min为第1分钟的A值
　　然后测定加样后邻苯三酚自氧化率：操作方法同上，加入邻苯三酚前分别加入2、4、6、8、10、12、14、18 mg/mL不同浓度猴头菌水提物、醇提物。计算加样后邻苯三酚自氧化速率，得出对O?-?2?的抑制率。
　　抑制率＝［(A 0-A i)∕A 0］×100%
　　A 0：邻苯三酚自氧化率，A i：加样后的邻苯三酚自氧化率
　　潘 伟，等：猴头菌提取物抗氧化活性研究
　　2 结果与分析
　　2.1总还原力大小
　　在2～18 mg/mL范围内，水提物总还原力很低，不随着浓度的增加而增加；醇提物总还原力随浓度的增加而升高，浓度为18 mg/mL时相当于0.09 mg/mL 维生素C的总还原力（ 图1）。

天然抗氧化剂的开发资源

用于抗氧化剂开发的天然物质资源非常广泛，主要可归纳为以下几类：
香辛料
香辛料是指一类具有芳香和辛香等典型风味天然植物性制品，或从植物(花、叶、茎、根、果实或全草等)所提取某些香精油，包括八角、小豆落、生姜、姬茵香、芹菜、肉桂、丁香、月桂叶、肉豆蔑、马郁兰、薄荷属、迷迭香、风轮菜、鼠尾草、百里香、牛至草等。几百年前，香辛料就被用于增强食品香味，延长食品保存时间，近几十年，香辛料抗氧化性得到广泛关注和研究，香辛料主要抗氧化成分为酚类及其衍生物。
1951年，Chipult等经对犯种香辛料进行抗氧化试验研究，发现迷迭香和鼠尾草具有优异抗氧化能力;后来从中分离出迷迭香酚、鼠尾草酚等几种强抗氧化成分。从部分唇形科香辛料如牛至草中分离出5种具有抗氧化活性的酚类化合物，如原儿茶酸、香芹酚、康香草酚、咖啡酸等，这5种化合物均比犷生育酚抗氧化活性高，其抗氧化效果与BHA相类似闭。Lee等闭指出，胡椒类黄酮、亲脂酚类和其它非极性化合物具有抗氧化活性，其中毛地黄黄酮(3，4，5，7一四轻基黄酮)抗氧化能力最强，这种强抗氧化活性归因于其芳香环上邻苯经基。Kikuzaki和Nakatani〔5〕从生姜中分离出14种酚类化合物，包括姜酮和姜醇，其中12种化合物有比犷生育酚强的抗氧化能力。Yanishiieva等闹报道用夏日薄荷乙醇提取物作为天然抗氧化剂，研究其对葵花籽油在煎炸温度下稳定性影响。
此外，百里香精油含有百里香酚和香芹酚，荔枝精油中富含环丙烷基脂肪酸，大蒜含有多种烯丙基硫化物，丁香中丁子香酚和没食子酸，肉豆范中辛基苯酮等物质都有不同程度抗氧化性。
中草药
许多学者认为某些中草药疗效与其抗氧化作用密切相关，中草药是继香辛料之后另一个很有潜力的天然抗氧化剂资源。
我国台湾学者对195种中草药的抗氧化性能进行系统筛选和评价，发现几乎一半的中草药表现出抗氧化作用，其中22种中草药乙醇提取物抗氧化能力强于等重量生育酚川。韩国KIM等对180种中药甲醇提取物进行试验，发现其中科种对油酸有强抗氧化能力；进一步又以油酸甲醋为底物试验，发现其中11种中药具有特别强抗氧化能力，它们是乌附子、细辛、白屈菜、甘草、补骨脂、黄等、丁香等川。谷利伟、翁新楚等使用快速氧化酸败测定仪对1200多种中药进行抗氧化性试验，取得一定的成果，首次发现20多种具有较强抗氧化性中草药，其中包括风眼草等6种中药抗氧化能力是迷迭香萃取物二倍，无毒且来源便宜，具有应用价值闻。此外，除对中草药提取物抗氧化性能进行实验外，许多学者还对提取物中抗氧化成分进行研究。金锦香甲醇提取物中有逆没食子酸、没食子酸及没食子酸甲酷等6种复杂的水溶性单宁和单宁贰类化合物，它们对油酸的抗氧化能力除没食子酸外均强于生育酚。从金锦香的乙酸乙醋提取物中分离得到质榭皮素、山奈酚及它们的三种糖贰化合物，也有较强抗氧化性。
研究报道，丹参中抗氧化活性成分，这些成分是二氢丹参酮I、丹参酮I、甲烷丹参酮、隐丹参酮和丹参酮H。其中，二氢丹参酮I抗氧化活性比BHA和BHT强，其余的也与BHA和BHT相当。甘草中含有多种黄酮类化合物，其中甘草查儿酮A、甘草查儿酮B和甘草异黄酮有较强清除自由基和抑制酶促氧化作用;土木香中含有土木香内酷和异土木香内酷的抗氧化能力优于生育酚和泛醒闭。桂皮中存在的抗氧化物质，经UV，IR、HNM分析，确定为菇烯类物质。桂皮甲醇浸膏用氯仿分离得到组分对猪油有较强抗氧化活性，其抗氧化能力与PG相当。Cao和zhu研究千金子(Radixstephaniatetrandra，S.Moore)中生物碱一粉防己碱(Tetrandrine，Tn)抗氧化性能，与常用抗氧化剂相比，TD比v。和PG更容易与过氧化游离基结合，因而具有较强抗氧化能力，这种抗氧化性归因于其具有的双酷结构。另外，对厚朴、过路黄、忍冬叶的抗氧性均有研究报道。
茶叶
茶叶富含一类多经基的酚性物质，称为茶多酚，是一类以儿茶素类为主体多酚类，它们基本结构为2一连(或邻)苯酚基苯并毗喃衍生物，是一种新型天然抗氧剂。在茶多酚中，起抗氧化作用的物质主要有以下四种:(l)表儿茶素;(2)表没食子儿茶素;(3)表儿茶素没食子酸酷;(4)表没食子儿茶素没食子酸醋。由于在结构中具有连或邻苯酚基，所以，抗氧化活性要比一般非酚性或单酚基类抗氧化剂强。
茶多酚抗氧化能力强于维生素E10一20倍，川上等发现茶的儿茶素类对含有27%DHA鱼油氧化有明显抑制作用，添加30ppm量对鱼油过氧化诱导时间则可延长6倍时间，将茶多酚酒精溶液喷酒在火腿、腌制肉表面可延长其保存期限，在方便面中添加50ppm茶多酚即可达到抗氧化效果。在大豆色拉油中添加50ppm一100ppm茶多酚可有效地防止其氧化，且茶多酚抗氧化效果为vE的4一7倍。茶多酚对精炼苏子油和双低菜籽色拉油也具有良好抗氧化效果，其抗氧化性约为常用抗氧化剂BHT3倍。1988年，卫生部在天津召开的全国食品添加剂卫生标准协作会第十三次会议上，承认了茶叶天然抗氧化剂为我国食品添加剂之一。
食品类
谷物和食用油脂是较早用作天然抗氧化剂科学研究对象。1935年，Musher发现谷物中一些成分具有抗氧化作用，并于次年取得美国专利。1946年，Evens和Olcott等发现植物油中生育酚及其抗氧化作用。此后，人们又从植物油中提取出其它抗氧化成分:芝麻酚、谷维素、棉酚、胡萝卜素、角鳖烯、磷脂、街醇等。从大豆、豌豆、花生、燕麦、蚕豆中提取抗氧化剂研究也有不少报道。
众多果蔬类植物亦表现出优异抗氧化性能。能势征子等经研究指出，洋葱、辣椒和款冬茎具有较强抗氧化能力，且大多数蔬菜均有微弱抗氧化性能。对水果抗氧化性研究发现，几种水果抗氧化成分主要是黄酮类化合物、抗坏血酸和其它有机酸。许申鸿等研究表明，葡萄籽和葡萄皮水提物对o·、·OH及DPPH自由基均有较强清除作用，且抗自由基活性为鲜葡萄籽>葡萄皮>干葡萄籽。张立新等对21种蔬菜抗氧化能力比较研究中发现:茄子(尤其是茄子皮)、苔菜、尖椒、菜椒、西红柿对DPPH的抑制率较高，具有较高抗氧化活性帅〕。钱明赛测试11种水果中，发现草幕抗氧化性最高，其次是李果、抑橙等山〕。郭长江对坚果类食物清除ROO·作用研究发现，葵花籽具有较强清除ROO·作用，花生、核桃次之。研究表明绿豆皮乙酸乙醋萃取物具有较强抗氧化性能，0.03%乙酸乙醋萃取物抗氧化性优于相同浓度维生素E，略低于化学合成抗氧化剂TBHQ。
其它原料
花生壳中木犀草素，高良姜中高良姜精，槐米中芦丁，牛至草中芹菜素，锦地罗中棚皮素等属于黄酮类化合物，它们对油脂抗氧化活性相当或高于BHT效果。大豆、水稻壳、大麦绿叶也含有黄酮类化合物，均有较好抗氧化能力。
蛋白质水解物、氨基酸和Maillard反应产物也引起人们兴趣。山口直彦等用9种蛋白酶将大豆蛋白进行不同程度水解后，发现水解度为177%组分具有较强抗氧化作用。其他学者对蛋白质水解物和氨基酸抗氧化性能进行研究，发现脯氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸、蛋氨酸等抗氧化性能较强，氨基酸的组成及分子量大小会影响肤的抗氧化能力，分子量在500一3，000内的肤抗氧化性能最佳。有学者从Mailfard反应生成物中分离出一种类黑精，其抗氧化能力与BHA相当。
细菌和酵母也被一些学者用以提取抗氧化剂，从发面酵母和碑酒酵母混合物中分离得到一种无色晶体抗氧化剂，其结构已得到确证。黑曲霉菌No.172苯提取物对猪油具有显著抗氧化性能。Fujimoto等研究发现，藻类具有抗氧化性能，其中褐藻和绿藻抗氧化能力较强，从中分离精制出抗氧化成分有脱镁叶绿素a、磷脂、嗅酚类化合物等。

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