毛细管电泳四色荧光检测法分析茶树SSR标记

将毛细管电泳四色荧光检测技术应用于茶树SSR标记分析．该方法采用三引物PCR扩增SSR位点，三引物即在5’端加有M13尾巴序列（5’-CACGACGTTGTAAAACGAC-3’）的特异正向引物、特异反向引物及带有荧光标记的通用型M13引物：为了运用四色荧光检测系统使通过一次毛细管电泳能同时检测3个以上的SSR位点．采用蓝、绿、黑3种不同颜色的荧光染料分别对3个M13引一物进行标记．应用该方法对42个茶树品种（系）的16个SSR位点进行遗传分析的结果表明：此法具有简便、可靠、低成本及高通量的优点；且随着所分析SSR位点数的增加，降低成本的效果更加显著．采用建立的方法，还筛选获得了11个多态性丰富的可应用于茶树遗传研究的SSR标记．

完成机构：[1]湖南农业大学茶学教育部重点实验室,中国湖南长沙410128 [2]湖南省茶业有限公司,中国湖南长沙410005

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