何首乌炮制作用的实验设计？

何首乌炮制作用的研究何首乌系蓼科植物何首乌(polygonummulti-florumThunb.)之块根，其有效成分蒽醌类能促进肠蠕动、抑制三酰甘油(TG)及胆固醇在肠道中的吸收，从而降低血脂;其另一有效成分二苯乙烯苷具有降胆固醇功能。何首乌炮制前后用法各异，作用亦不同，有必要探明其在炮制前后主要成分的变化。本实验采用紫外分光光度法测定何首乌炮制前后蒽醌类和二苯乙烯苷的含量。一仪器和试剂仪器：分光光度计;电热恒温水浴锅;电子读数天平;电光分析天平；大黄素对照品;二苯乙烯苷对照品;药材何首乌;制何首乌自己炮制；试剂：醋酸镁;氯仿;甲醇。二实验内容测定何首乌炮制前后蒽醌类和二苯乙烯苷的含量。三操作方法1、对照品溶液的配制精密称取对照品大黄素2.0mg于10mL量瓶中，用甲醇溶解、稀释并定容至刻度，得大黄素溶液，备用。精密称取对照品二苯乙烯苷2.5mg于10mL量瓶，用95%的乙醇溶解、稀释并定容至刻度，得二苯乙烯苷对照品溶液，备用。2、吸收光谱的绘制大黄素吸收光谱的绘制精密量取大黄素0.5mg于10mL量瓶中。用0.5%Mg(AC)2溶液显色，并加0.5%Mg(AC)2至刻度，在紫外分光光度计上，以0.5%Mg(AC)2为空白对照，在波长400~700nm范围内扫描，得吸收图谱。二苯乙烯苷吸收光谱绘制精密量取二苯乙烯苷对照品0.3mg于10mL量瓶中，95%乙醇稀释并加至刻度，以95%乙醇为空白对照，在200~400nm扫描，得吸收图谱。样品的含量测定精密称取生何首乌、制何首乌各0.5g于索氏提取皿中，加入氯仿150mL，提取4h，至氯仿回滴液无色，游离蒽醌提尽，过滤，挥干氯仿，以0.5%Mg(AC)2溶解并转移至10mL量瓶中，反复操作3次。并加0.5%Mg(AC)2至刻度。在510nm处，以0.5%Mg(AC)2为空白，测定吸收度，数据代入回归方程求得游离蒽醌的含量。上述过滤后残渣，加95%乙醇200mL，水浴回流4h，使二苯乙烯苷及结合蒽醌提取完全，过滤，回收部分乙醇，定容于50mL量瓶中。取2mL置于20mL量瓶中，95%乙醇定容。在310nm处，以95%乙醇为空白，测其吸收度，求得二苯乙烯苷的含量。四预期结果大黄素在510nm处有一最大吸收峰，二苯乙烯苷的乙醇溶液在波长310nm处有最大吸收峰。制何首乌中游离蒽醌的含量高于生何首乌中游离蒽醌的含量，而结合蒽醌的含量生何首乌则明显高于制何首乌五问题与讨论现代药理研究已证实，制何首乌具有增强免疫、改善记忆障碍及抗衰老等作用;而生何首乌有一定的毒性，长时间服用可引起动物消瘦、倦怠、动作迟缓和死亡。通过实验比较，制何首乌中游离蒽醌的含量高于生何首乌中游离蒽醌的含量，而结合蒽醌的含量生何首乌则明显高于制何首乌。测定结合蒽醌的含量时，萃取过程中振摇不宜过于剧烈，防止乳化，影响含量测定。

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